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          ELISA加樣時為何要避免氣泡的原因以及避免方法介紹

          更新時間:2021-03-01   點擊次數:4845次

              相信大家在很多說明書或教科書上都看到過這樣的一條提示,就是加樣時要避免出現氣泡,這到底是什么原因呢?因為在做實驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產生氣泡,這樣對實驗結果會產生什么影響呢?

           
          1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使
          2.孔內反應不均一。
          3.包被時有氣泡的話,將導致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
          4.封閉時有氣泡的話,將導致大量未結合位點的存在,引起非特異性結合--本底增高,假陽性。
          5.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性。
          6.加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
          7.加顯色液時有氣泡的話---顯色不*。
          8.加終止液時有氣泡的話(1、不能*終止反應 2、影響酶標儀比色,OD值增高)
          9.洗滌時有氣泡的話,非特異性結合物不能*洗去,做無用功。
           
          避免方法:
          1、加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
          2、封閉時一定要加滿孔,
          3、洗滌時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來終驅除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
           
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