尿微量白蛋白的檢測方法

　目前，尿微量白蛋白的檢測方法主要有：ELISA方法、放射免疫法、化學(xué)發(fā)光法、免疫透射比濁法以及免疫熒光法。

　　ELISA方法靈敏性高，但操作步驟多，等待檢測結(jié)果時間比較長，需要有門的實驗室、業(yè)人員完成，一般用于大批量標本的檢測。不適于少量或單份檢測的快速檢測。放射免疫法靈敏度高、操作簡便，測量和數(shù)據(jù)處理易于實現(xiàn)自動化。但因其為相對定量及存在放射線輻射、污染問題等應(yīng)用較少。化學(xué)發(fā)光法因其特異性、敏感性高、簡便快速、無需外來光源，背景噪音低應(yīng)用廣泛，但其選擇性差、其發(fā)射強度依賴于各種環(huán)境因素，需嚴格控制外界各種因素。免疫透射比濁法試劑較穩(wěn)定，自動化操作減少了人為誤差，但其檢測需核實的抗原抗體比例，需預(yù)先定值，否則造成誤差。免疫熒光法特異性強、敏感性高、操作簡便、檢測時間短，即可批量檢測也可單份檢測，是臨床上常用的快速定量檢測方法。

　　（1）尿液標本的采集

　　尿常規(guī)檢查所用的隨機尿標本雖常用但不推薦，24小時尿標本不易留取，一般可采用12小時夜尿（計量后取0.5－1ml送化驗室）；也可采用shou次晨尿或第二次尿，但注意尿液應(yīng)在膀胱內(nèi)超過3小時。

　　測試應(yīng)離心后采用上清液。測試尿微量白蛋白的時間：

　　1型糖尿病：發(fā)病5年或12歲以后，每年測1-3次；

　　2型糖尿病：診斷明確時測試，以后1-3次/年。

　　僅MAU陽性者：每3個月隨訪檢測。

　　（2）尿微量白蛋白的測定

　　先，應(yīng)多次測定。因為尿中含量的上落較大，單次測定可能會造成偏差。

　　如shou次測試為陽性則應(yīng)在3-6個月內(nèi)再測二次以上，如3次中有二次陽性則為早期腎病。

　　（3）檢測原理

　　依據(jù)免疫熒光雙抗體夾心法定量檢測人尿液標本中的尿微量白蛋白含量。將檢測緩沖液和人尿液樣本在檢測管中進行混合，緩沖液中熒光標記的抗人白蛋白抗體和尿液中的白蛋白抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，當(dāng)混合樣本加到檢測板樣品孔內(nèi)后，復(fù)合物通過層析作用擴散到硝酸纖維素膜的檢測線上并被檢測線上的人白蛋白抗體所捕獲。因此尿液樣本中白蛋白含量越高，檢測線上復(fù)合物積累量越多。熒光抗體的信號反映了被捕獲的白蛋白數(shù)量。通過免疫熒光檢測儀可檢測出尿液樣本中白蛋白的濃度。檢測儀默認的尿微量白蛋白檢測結(jié)果用mg/L為單位。尿微量白蛋白的檢測范圍是2~300 mg/L，讀數(shù)結(jié)果可jing確到0.01 mg/L。